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腦聲常談:動物抑郁行為實驗手冊丨新奇事物探索實驗方法、指標評價及注意事項
新奇事物探索實驗也叫新物體識別實驗,是一種較新的評價抑郁癥的典型癥狀:興趣缺失的行為學方法。其主要是研 究動物對新奇事物的探索行為,是基于動物先天的 尋求新奇的行為,并用此來評價抑郁癥模型是否存在興趣缺失癥狀的方法,一般情況下抑郁癥模型動物在新奇事物實驗中的探索行為減少。1998年Harris 等通過對慢性不可預測性應激模型大鼠研究第一次將動物對新奇物體的探索行為作為評 價抑郁癥動物模型興趣缺失的評價指標。
實驗材料
硬件:新奇事物探索實驗可以分為大鼠和小鼠測試,其中小鼠建議的測試箱規格為40cm*40cm*40cm的透明箱體,大鼠規格建議為72cm*72cm*40cm的透明箱體。
軟件:需要使用VisuTrack動物行為分析軟件,自動跟蹤實驗動物的頭部、重心及尾巴,考察動物頭部接觸物體的潛伏期、持續時間、接觸次數等偏好指標。
實驗方法
新奇事物探索實驗分為適應期和測試期兩個階段,操作步驟如下 :
(1) 適應期:動物放入自發活動測試箱,適應5min后,取出,放回原籠;
(2) 測試期:在同一環境條件下引入一新物體 (應放入中心位置),再將待測動物面壁放入測試箱,開始實驗;
(3) 檢測時間應為10min。
評價指標
潛伏期( latency period): 實驗開始至動物首次 主動探索(接觸)物體的時間。如規定檢測時間內,動物沒有接觸新物體,則潛伏期記錄為檢測時間。正常大鼠潛伏期多在130s 以內。
抑郁行為判斷標準:與對照組相比有顯著性增加(P0. 05)。(注:動物對新物體的探索標準:動物口鼻在新奇物體≤ 2cm范圍內,直指向新奇物體或直接接觸物體。
注意事項
所有行為學實驗都要求周圍安靜,實驗應在隔音,光強度和溫、濕度適宜且保持一致的行為實驗室內進行。
實驗前需要對實驗動物每天撫摸1-2min以減少非特異性應激刺激對實驗動物的影響;實驗前需要提前至少3小時將動物帶入實驗室,降低動物對新環境的不安情緒。
實驗過程盡量是同一個人在每天的同一個時段來做;若多個人多批動物重復一個實驗更有說服力。
進行曠場檢測時,需要對實驗動物進行篩選,有些實驗動物在水平方向或垂直方向的活動情況顯著低于同批動物平均水平,則需要將這些動物預先剔除。
每次小鼠的放置位置盡量統一,背朝物體,且距兩物體距離相等。
做下一只小鼠之前必須用酒精除去氣味清洗實驗設備,用衛生紙擦干凈,保證不要留下排泄物和味道。
物體盡量為圓形較好,正方形或者長方形有四個角,動物可能會產生偏好。
NOR實驗對動物各方面影響較小,而其他行為學實驗(如強迫游泳、水迷宮、懸尾實驗)對小動物影響較大,因此同一批動物進行不同行為學測試時,應先進行NOR實驗。
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